No (4956)
Yes (4820)
Number of found documents:
9776
Published from
to
Mikrovaskulární změny na sítnici oka u schizofrenie a deprese
Janáčková, Patrícia; Kudláčková, Zděnka; Herink, Josef
2023 - Slovak
Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department: Department of Biological and Medical Science Candidate: Patrícia Janáčková Thesis supervisor: PhDr. Zděnka Kudláčková, Ph.D. Consultant: Prof. MUDr. Ladislav Hosák, Ph.D., Mgr. Veronika Bernhauerová, Ph.D. Thesis Title: Microvascular Changes in the Retina of the Eye in Schizophrenia and Depression Introduction: Mental disorders affect an increasingly large part of the population and negatively affect the quality of life of patients. The course, relapses and therapy of these diseases depend on the early initiation of therapy. Increasing the quality of treatment, diagnosis and assistance for disabled individuals are the main reasons why we started this research. Aim of the work: The main aim of our work was to assess the association between microvascular changes in the retina of the eye and psychological disorders, namely schizophrenia and depression. We also paid attention to demographic and clinical factors that could influence these changes. We were also interested in the etiopathogenesis, treatment and influence of inflammation on schizophrenia and depression, anatomy and vascular supply of the eye or a detailed description of the retina and its pathology. Metodology: The largest part of the research took place at the... Univerzita Karlova v Prahe, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra biologických a lekárskych vied Autor: Patrícia Janáčková Vedouci diplomovej práce: PhDr. Zděnka Kudláčková, Ph.D. Konzultant: Prof. MUDr. Ladislav Hosák, Ph.D., Mgr. Veronika Bernhauerová, Ph.D. Názov práce: Mikrovaskulárne zmeny na sietnici oka u schizofrénie a depresie Úvod: Psychické poruchy postihujú stále väčšiu časť populácie a negatívne ovplyvňujú kvalitu života pacientov. Priebeh, relapsy a terapia týchto ochorení sú závislé na skorom započatí terapie. Zvýšenie kvality liečby, diagnostiky a pomoci postihnutým jedincom patria medzi hlavné dôvody, prečo sme tento výskum zahájili. Cieľ práce: Hlavným cieľom našej práce bolo posúdiť súvislosť medzi mikrovaskulárnymi zmenami na sietnici oka a psychickými poruchami, konkrétne schizofréniou a depresiou. Pozornosť sme venovali aj demografickým a klinickým faktorom, ktoré by tieto zmeny mohli ovplyvňovať. Ďalej nás zaujímala etiopatogenéza, liečba a vplyv zápalu na schizofréniu a depresiu, anatómia a cievne zásobenie oka či podrobný popis sietnice a jej patológia. Metodika: Najväčšia časť výskumu prebiehala na Psychiatrickej klinike Fakultnej nemocnice v Hradci Králové a zapojených bolo 255 subjektov rozdelených do štyroch skupín - schizofrénni pacienti, depresívni...
Available in a digital repository NRGL
Mikrovaskulární změny na sítnici oka u schizofrenie a deprese
Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department: Department of Biological and Medical Science Candidate: Patrícia Janáčková Thesis supervisor: PhDr. Zděnka Kudláčková, ...
Exprese, lokalizace a interaktom proteinu RefZ v průběhu sporulace u Bacillus subtilis.
Paliesková, Anna Mária; Krásný, Libor; Nešvera, Jan
2023 - Slovak
Bacillus subtilis is a gram-positive sporulating bacterium. Under unfavorable conditions, it initiates the sporulation process that results in a resistant spore. The transcription factor Spo0A is a master regulator of sporulation initiation. The hallmark of sporulation is the formation of an asymmetric septum near a cell pole, which divides the cell into the larger mother cell and smaller prespore. The asymmetric septum is localized at 1/6 of the cell length relative to the nearer pole. One of the players involved in this localization is the RefZ protein, referred to as the FtsZ regulatory protein, which forms the Z-ring. The Z-ring is important for the formation of both the vegetative (mid-cell) and asymmetric septa. RefZ facilitates the relocalization of the Z-ring from midcell to the poles at an early stage of sporulation. RefZ also binds DNA (RefZ binding motifs [RBMs]) near the ori site of the chromosome, thereby promoting precise positioning of the chromosome arms during sporulation. The entire sporulation process is controlled by a cascade of compartment-specific sporulation σ factors that recognize specific consensus sequences in the promoter regions of genes, thereby allowing RNA polymerase to initiate transcription of sporulation-specific genes. These σ factors ensure spatially and... Bacillus subtilis je gram-pozitivní sporulující bakterie. Za nepříznivých životních podmínek zahajuje sporulační proces, jehož výsledkem jsou rezistentní spory. Hlavním regulátorem iniciace sporulace je transkripční faktor Spo0A. Charakteristickým znakem sporulace je tvorba asymetrického septa na buněčném pólu, které rozděluje buňku na větší mateřskou buňku a menší prespóru. Asymetrické septum je umístěno v 1/6 od nejbližšího pólu buňky, a proces lokalizace je komplexní. Jedním z aktérů podílejících se na této lokalizaci je protein RefZ, který reguluje protein FtsZ, tvořící Z-kruh. Z-kruh je důležitý pro formování vegetativního (uprostřed buňky) i asymetrického septa. RefZ konkrétně napomáhá relokalizaci Z-kruhu ze středu buňky k pólům v rané fázi sporulace. Kromě toho je RefZ protein vázající se na DNA, který se váže na vazebné motivy RefZ (RefZ binding motives [RBMs]) v blízkosti počátků replikace (ori) chromozomů, čímž podporuje přesné umístění ramen chromozomů během sporulace. Celý proces sporulace je regulován kaskádou prostorově specifických sporulačních faktorů σ, které rozpoznávají specifické konzervované (konsenzus) sekvence v promotorových oblastech genů, čímž umožňují RNA polymeráze interagovat s promotorem konkrétního genu a zahájit jeho transkripci. Takto faktory σ zajišťují prostorově...
Keywords:
transkripce; promotor; sporulační faktory sigma; sporulace; Spo0A; RefZ; transkripction; promoter; sporulation sigma factors; sporulation; Spo0A; RefZ
Available in a digital repository NRGL
Exprese, lokalizace a interaktom proteinu RefZ v průběhu sporulace u Bacillus subtilis.
Bacillus subtilis is a gram-positive sporulating bacterium. Under unfavorable conditions, it initiates the sporulation process that results in a resistant spore. The transcription factor Spo0A is a ...
Numerické optimalizace experimentů NMR pevné fáze
Šmelko, Andrej; Tošner, Zdeněk; Chlan, Vojtěch
2023 - Slovak
Numerical optimizations of solid-state nuclear magnetic resonance experiments are one of the possible solutions to its low sensitivity. Using the Average Hamiltonian Theory, the negative effects of the radiofrequency field inhomogeneity on magnetization transfer were investigated. To overcome these effects, the Average Hamiltonian Theory was employed in the optimization of commonly used techniques such as Ramp-CP and Adiabatic-CP, optimization of pulses with arbitrarily modulated amplitude and new periodic pulses with arbitrarily modulated amplitudes and phases. Both types of shaped pulses achieved significantly higher efficiencies than Ramp- CP and Adiabatic-CP. The highest efficiency enhancement was calculated at high spinning frequencies and low dipolar coupling constants where the effect of the inhomogeneity is the strongest. Numerické optimalizácie experimentov nukleárnej magnetickej rezonancie pevnej fázy sú jedným z možných riešení nízkej citlivosti tejto metódy. Využitím teórie priemerného Hamiltoniánu boli preskúmané negatívne vplyvy nehomogenity rádiofrekvenčných polí na prenos magnetizácie medzi jadrami. Následne, za účelom ich prekonania, bola táto teória využitá na optimalizáciu bežne používaných techník Ramp-CP a Adiabatic-CP, pulzov s ľubovoľne modulovanou amplitúdou, aj úplne nových, periodických pulzov s ľubovoľnou amplitúdou a fázou. Obidva typy tvarovaných pulzov dosahujú výrazne vyššie teoretické účinnosti, než zaužívané techniky. K najvýznamnejšiemu nárastu účinnosti došlo pri vysokých rýchlostiach rotácie vzorky a nízkych dipól-dipólových interakčných konštantách, kedy je vplyv nehomogenity rádiofrekvenčných polí najvýraznejší.
Keywords:
NMR; pevná fáze; optimalizace; rekapling; NMR; solid-state; optimization; recoupling
Available in a digital repository NRGL
Numerické optimalizace experimentů NMR pevné fáze
Numerical optimizations of solid-state nuclear magnetic resonance experiments are one of the possible solutions to its low sensitivity. Using the Average Hamiltonian Theory, the negative effects of ...
Vliv dapagliflozinu na expresi a funkci endoglinu a s ním souvisejících biomarkerů endotelové dysfunkce v lidských diabetických koronárních endotelových buňkách
Vavreková, Valéria; Tripská, Katarína; Fikrová, Petra
2023 - Slovak
Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Effect of dapagliflozin on the expression and function of endoglin and related biomarkers of endothelial dysfunction in human diabetic coronary artery endothelial cells Author: Valéria Vavreková Supervisor of Diploma Thesis: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Aim: The aim of this thesis was to investigate how dapagliflozin affects the expression and function of endoglin (Eng) and related biomarkers of endothelial dysfunction at different times and concentrations in human diabetic cells. Methods: In this thesis, we worked with human diabetic coronary endothelial cells. We premedicated these with dapagliflozin at different times and concentrations, and dimethyl sulfoxide was used as a control. We measured protein expression of Eng and biomarkers of endothelial dysfunction using flow cytometry. We also used flow cytometry to measure the rate of monocyte adhesion to endothelial. Using ELISA, we detected soluble endoglin (sEng) levels. Results: We demonstrated that a 1nM concentration of dapagliflozin during a 12-hour premedication period led to a decrease in protein expression of adhesion molecules. We further showed that protein expression of Eng was also significantly reduced... 6 ABSTRAKT Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Názov diplomovej práce: Vplyv dapagliflozínu na expresiu a funkciu endoglínu a s ním súvisiacich biomarkerov endotelovej dysfunkcie u ľudských diabetických koronárnych endotelových buniek Autor: Valéria Vavreková Vedúci diplomovej práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cieľ práce: Cieľom tejto diplomovej práce bolo zistiť, ako dapagliflozín vplýva na expresiu a funkciu endoglínu (Eng) a s ním súvisiacich biomarkerov endotelovej dysfunkcie v rôznych časoch a koncentráciách u ľudských diabetických buniek. Metódy: V tejto diplomovej práci sme pracovali s ľudskými diabetickými koronárnymi endotelovými bunkami. Tie sme premedikovali dapagliflozínom v rôznych časoch a koncentráciách, a dimethylsulfoxid bol použitý ako kontrola. Pomocou prietokovej cytometrie sme merali proteínovú expresiu Eng a biomarkerov endotelovej dysfunkcie. Pomocou prietokovej cytometrie sme tiež merali mieru adhézie monocytov k endotelovým bunkám. Za využitia metódy ELISA, sme detekovali hladiny solubilného endoglínu (sEng). Výsledky: Preukázali sme, že 1nM koncentrácia dapagliflozínu počas 12- hodinovej premedikácie viedla k zníženiu expresie proteínov adhéznych molekúl. Ďalej sme zistili, že aj proteínová expresia Eng sa významne...
Available in a digital repository NRGL
Vliv dapagliflozinu na expresi a funkci endoglinu a s ním souvisejících biomarkerů endotelové dysfunkce v lidských diabetických koronárních endotelových buňkách
Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Effect of dapagliflozin on the expression and function of endoglin and ...
Hodnocení oxidace nutričních substrátů v průběhu gravidity.
Huličiarová, Klaudia; Hronek, Miloslav; Kovařík, Miroslav
2023 - Slovak
Background The aim of this diploma thesis was to determine and evaluate changes in resting energy expenditure and oxidation of nutritional substrates, then to assess connections with other parameters and to compare these results with other conducted studies. Methods Indirect calorimetry was used to determine resting energy expenditure and oxidation of nutritional substrates. Measurements of pregnant women took place after a 12-hour fast in three periods of pregnancy. The first period between 17.-27. week of pregnancy, the second between 28.-35. weeks of pregnancy and the last during the 36th-38th week of pregnancy. Results The results of the work point to significantly increasing values of respiratory quotients (p = 0.022) and carbohydrate oxidation (p = 0.015) with the length of pregnancy, and to statistically significant correlations between the oxidation of nutritional substrates and the values of RQ, NPRQ, the volume of excreted urine, the amount of creatinine, urea and nitrogen in the excreted urine. Conclusions In this work, an increase in respiratory quotient values and carbohydrate oxidation during pregnancy was confirmed. However, the suspension of the study due to the Covid situation caused a decrease in the number of pregnant women followed and the necessary results. Key words:... Cieľ práce Cieľom tejto diplomovej práce bolo stanoviť a zhodnotiť zmeny pokojového energetického výdaja, a oxidácií nutričných substrátov, následne posúdiť súvislosti s ďalšími parametrami, a porovnať tieto výsledky s inými prevádzanými štúdiami. Metódy K stanoveniu pokojového energetického výdaja a oxidácie nutričných substrátov sa využívala nepriama kalorimetria. Merania tehotných žien prebiehali po 12-hodinovom hladovaní v troch obdobiach tehotenstva. Prvé obdobie v rozmedzí 17.-27. týždňa tehotenstva, druhé medzi 28.-35. týždňom tehotenstva a posledné počas 36.-38. týždňa tehotenstva. Výsledky Výsledky práce poukazujú na signifikantne sa zvyšujúce hodnoty respiračných kvocientov (p = 0,022) a oxidácie sacharidov (p = 0,015) s dĺžkou tehotenstva a k štatisticky významným koreláciám medzi oxidáciou nutričných substrátov a hodnotami RQ, NPRQ, objemom vylúčenej moči, množstvom kreatinínu, močoviny a dusíka vo vylúčenom moči. Závery V tejto práci bolo potvrdené zvýšenie hodnôt respiračných kvocientom a oxidácia sacharidov počas tehotenstva. Avšak, pozastavenie štúdie, vzhľadom ku Covid situácií, spôsobilo zníženie počtu sledovaných tehotných žien a potrebných výsledkov. Kľúčové slová: tehotenstvo, nepriama kalorimetria, pokojový energetický výdaj, oxidácia nutričných substrátov, sacharidy, lipidy,...
Keywords:
klidový energetický výdej; resting energy expenditure; pregnancy
Available in a digital repository NRGL
Hodnocení oxidace nutričních substrátů v průběhu gravidity.
Background The aim of this diploma thesis was to determine and evaluate changes in resting energy expenditure and oxidation of nutritional substrates, then to assess connections with other parameters ...
Současné trendy v terapií dyslipidémií
Krupová, Tatiana; Nachtigal, Petr; Tripská, Katarína
2023 - Slovak
Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Current trends in dyslipidemia therapy Author: Tatiana Krupová Supervisor of Diploma Thesis: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D Background: The purpose of this diploma thesis is to describe therapeutic options of different types of dyslipidemia with focus on current trends and new discoveries regarding this matter. Main findings: This diploma thesis emphasizes the importance of correct treatment of dyslipidemia using well-known drugs, as well as new groups of medications to enable the prevention of cardiovascular diseases, the main cause of mortality worldwide. Conclusion: The information gathered for this diploma thesis confirms significant progress in the development of new types of treatment, which consequently makes it possible to better prevent complications that are mainly manifested by the development of cardiovascular diseases. Keywords: cholesterol, lipids, lipoproteins, dyslipidemia, coronary heart disease, statins, fibrates, sequestrants, ezetimibe, niacin, omega-3 fatty acids, phytosterols, fiber, PCSK9 inhibitors, bempedoic acid, mipomersen, volanesorsen, lomitapide, evinacumab, inclisiran, LXR agonists Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lekárskych vied Názov diplomovej práce: Súčasné trendy v terapii dyslipidémií Autor: Tatiana Krupová Vedúci diplomovej práce: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Cieľ práce: Cieľom tejto diplomovej práce je popísať možnosti terapie rôznych typov dyslipidémií so zameraním na súčasné trendy a nové poznatky v tejto oblasti. Hlavné poznatky: Diplomová práca zdôrazňuje dôležitosť správnej liečby dyslipidémie za využitia známych aj nových skupín liečiv, aby bolo možné predchádzať chorobám srdcovo- cievneho systému, ktoré dnes radíme medzi najčastejšie príčiny mortality na svete. Vývoj nových molekúl je markantný, významné sú tieto liečivá najmä u pacientov, u ktorých nedosahujeme želané výsledky pomocou už známych látok. Záver: Informácie získané pre vypracovanie diplomovej práce potvrdzujú, že vývoj nových typov liečby dyslipidémie výrazne napreduje a umožňuje tak lepšie predchádzať komplikáciám, ktoré sa najčastejšie manifestujú rozvojom kardiovaskulárnych ochorení. Kľúčové slová: cholesterol, lipidy, lipoproteíny, dyslipidémia, ischemická choroba srdca, statíny, fibráty, sekvestranty, ezetimib, niacín, omega-3 mastné kyseliny, fytosteroly, vláknina, PCSK9 inhibítory, kyselina bempedoová, mipomersen, volanesorsen,...
Available in a digital repository NRGL
Současné trendy v terapií dyslipidémií
Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Current trends in dyslipidemia therapy Author: Tatiana Krupová ...
Vliv blokády endoglinu na zánětem indukovanou endotelovou dysfunkci v lidských aortálních endotelových buňkách
Škubová, Andrea; Tripská, Katarína; Svobodová, Zuzana
2023 - Slovak
Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Effect of endoglin blockage on inflammation-induced endothelial dysfunction in human aortic endothelial cells Author: Andrea Škubová Supervisor of Diploma Thesis: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Aim: The aim of this thesis was to describe the effect of TNF-α and LPS-induced inflammation on the expression of endoglin and its transcription factors, the expression of biomarkers of endothelial dysfunction, the levels of soluble endoglin, and the adhesion and transmigration of monocytes through human aortic endothelial cells. We further investigated the effect of endoglin blockage by the monoclonal antibody TRC105 (carotuximab) on these processes. Methods: In this thesis, human aortic endothelial cells (HAEC) were used, and they were exposed for 16 hours to TNF-α (10 ng/ml) and LPS (100 ng/ml) and for 12 hours to TRC105 (300 µg/ml). The mRNA expression of endoglin and its transcription factors (KLF6, RelA, NR1H3), mRNA expression of inflammatory adhesion molecules (ICAM-1, VCAM-1, SELE) and mRNA expression of MMP-14 enzyme were measured by real time qRT-PCR. Using flow cytometry, we detected protein levels of endoglin, protein levels of inflammatory adhesion molecules... Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Názov diplomovej práce: Vplyv blokácie endoglínu na zápalom indukovanú endotelovú dysfunkciu u ľudských aortálnych endotelových buniek Autor: Andrea Škubová Vedúci diplomovej práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cieľ práce: Cieľom tejto diplomovej práce bolo popísať vplyv zápalu indukovaného prostredníctvom TNF-α a LPS na expresiu endoglínu a jeho transkripčných faktorov, expresiu biomarkerov endotelovej dysfunkcie, hladinu solubilného endoglínu a adhéziu a transmigráciu monocytov cez ľudské aortálne endotelové bunky. Ďalej sme chceli objasniť vplyv blokácie endoglínu prostredníctvom monoklonálnej protilátky TRC105 (carotuximab) na tieto procesy. Metódy: V tejto diplomovej práci boli použité ľudské aortálne endotelové bunky (HAEC), ktoré boli vystavené po dobu 16 hodín pôsobeniu TNF-α (10 ng/ml) a LPS (100 ng/ml) a po dobu 12 hodín pôsobeniu TRC105 (300 µg/ml). Metódou real-time qRT-PCR sme merali mRNA expresiu endoglínu a jeho transkripčných faktorov (KLF6, RelA, NR1H3), mRNA expresiu zápalových adhéznych molekúl (ICAM-1, VCAM-1, SELE) a mRNA expresiu enzýmu MMP- 14. Pomocou prietokovej cytometrie sme detekovali proteínové hladiny endoglínu, proteínové hladiny zápalových adhéznych molekúl (ICAM-1,...
Available in a digital repository NRGL
Vliv blokády endoglinu na zánětem indukovanou endotelovou dysfunkci v lidských aortálních endotelových buňkách
Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Effect of endoglin blockage on inflammation-induced endothelial ...
Syntéza fosfono-bis(fosfinátového) derivátu cyklamu
Chrappa, Michal; Hermann, Petr; Veselý, Jan
2023 - Slovak
Radiopharmaceuticals containing copper isotopes can be used as diagnostic tools (methods PET, SPECT) or agents for tumour treatment. Copper radionuclides must be applied into the organism in the form of a coordination compound with suitable ligand. Derivatives of 1,4,8,11-tetraazacyclotetradecane (cyclam) are some of the most suitable ligands for Cu (II). A coordination compound must be thermodynamically stable and kinetically inert, the ligand must coordinate the metal ion as quickly as possible. In this Diploma thesis, one of the first unsymmetrically substituted derivatives of cyclam has been synthesized using two methods of orthogonal protection. The synthesized ligand contains one phosphonate and one methylene bis(phosphinate) pendant arm. Copper complex of the ligand was prepared, and its acid assisted dissociation kinetics were studied. Radiofarmaka obsahující izotopy mědi jsou potenciálně využitelné pro diagnostiku (metody PET, SPECT) nebo léčbu nádorů. Radionuklidy mědi musí být do těla aplikované ve formě koordinační sloučeniny s vhodným ligandem. Pro mědnatý ion jsou jedny z nejvhodnějších ligandů deriváty 1,4,8,11-tetraazacyklotetradekanu (cyklamu). Výsledný komplex musí být termodynamicky stabilní a kineticky inertní. Ke koordinaci iontu kovu na ligand musí docházet v co možná nejkratším čase. V rámci této práce byl syntetizován jeden z prvních asymetricky substituovaných derivátů cyklamu s využitím dvou typů ortogonálního chránění makrocyklu. Syntetizovaný ligand obsahuje fosfonátové a methylen-bis(fosfinátové) pedantní rameno. Připravený byl taktéž mědnatý komplex tohoto ligandu a byla studována jeho disociační kinetika v kyselém prostředí.
Keywords:
rádioterapia; PET; SPECT; komplexy medi; deriváty cyklámu; fosfónové kyseliny; radiotherapy; PET; SPECT; copper complexes; cyclam derivatives; phosphonic acids
Available in a digital repository NRGL
Syntéza fosfono-bis(fosfinátového) derivátu cyklamu
Radiopharmaceuticals containing copper isotopes can be used as diagnostic tools (methods PET, SPECT) or agents for tumour treatment. Copper radionuclides must be applied into the organism in the form ...
Vývoj metód pre elektrochemické stanovenie chloramfenikolu a dinitraminu na amalgámových elektródach
Štafurová, Kristína; Fischer, Jan; Vyskočil, Vlastimil
2023 - Slovak
The first part of this diploma thesis deals with the determination of chloramphenicol (CLF) on the retractable-pen-based renewable silver amalgam film electrode (RAE) by differential pulse voltammetry (DPV). Calibration dependencies in the concentration range of 10-100 µmol dm−3 and 1-10 µmol dm−3 were obtained. Repeated RAE surface restoration when determining CLF does not contribute to the repeatability of the signal. The determination limit was 2,2 µmol dm−3 . In the second part of the work, the conditions for the determination of dinitramine (DN) were examined on the meniscus-modified silver solid amalgam electrode by DPV technique. The Britton-Robinson buffer pH 5 was chosen as the optimal medium. In this electrolyte, the impact of regeneration potentials on DN signal stability was monitored. Regeneration pulses or methanol rinses did not contribute to the stability of the signal. There is a strong passivation on the electrode, so this type of electrode is not suitable for determination of this analyte. The possible solution is to use RAE, in which mechanical surface restoration is an effective way of solving the passivation on the electrode surface. In the third part of the work, dinitramine was studied at the RAE. The best repeatability of the measurements was achieved by activation of the... Prvá časť tejto diplomovej práce sa zaoberá stanovením chloramfenikolu (CLF) metódou diferenčnej pulznej voltampérometrie (DPV) na striebornej amalgámovej filmovej elektróde obnoviteľnej mechanizmom klikacieho pera (RAE). Boli získané kalibračné závislosti pre rozsah 10-100 µmol dm−3 a 1-10 µmol dm−3 . Opakovaná obnova povrchu RAE pri stanovení CLF neprispieva k opakovateľnosti signálu. Medza stanoviteľnosti bola určená na 2,2 µmol dm−3 . V druhej časti práce boli skúmané podmienky pre stanovenie dinitraminu (DN) na meniskom modifikovanej striebornej pevnej amalgámovej elektróde pomocou techniky DPV. Prostredie Brittonov-Robinsonovho pufru o pH 5 bolo zvolené ako optimálne. V tomto prostredí bol sledovaný vplyv regeneračných potenciálov na stabilitu signálu DN. Regeneračné pulzy ani oplachy metanolom neprispievali k stabilite signálu. Na elektróde dochádza k silnej pasivácii, preto tento typ elektródy nie je vhodný na stanovenie tohoto analytu. Riešenie sa ponúkalo v podobe RAE, u ktorej je mechanická obnova povrchu efektívny spôsob riešenia pasivácie na povrchu elektródy. V tretej časti práce bol dinitramin študovaný na RAE. Najlepšia opakovateľnosť meraní bola docielená aktiváciou elektródy, opláchnutím elektródy metanolom a obnovou jej povrchu. V optimálnom prostredí Brittonov-Robinsonovho pufru...
Keywords:
Obnoviteľná elektróda; Strieborná amalgámová filmová elektróda; Voltampérometria; Chloramfenikol; Dinitramin; Minimalizácia pasivácie; Renewable electrode; Silver amalgam film electrode; Voltammetry; Chloramphenicol; Dinitramine; Passivation minimalization
Available in a digital repository NRGL
Vývoj metód pre elektrochemické stanovenie chloramfenikolu a dinitraminu na amalgámových elektródach
The first part of this diploma thesis deals with the determination of chloramphenicol (CLF) on the retractable-pen-based renewable silver amalgam film electrode (RAE) by differential pulse voltammetry ...
Adaptace enzymových metod pro testování s vysokou propustností s využitím ECHO-MS
Kráľová, Zuzana; Mertlíková Kaiserová, Helena; Šácha, Pavel
2023 - Slovak
High throughput screening for potential inhibitors of enzyme purine nucleoside phosphorylase (PNP) was developed during the work on this thesis. Products of PNP-catalysed reaction, hypoxanthine and ribose-1-phosphate, were quantified using mass spectrometry. Advantages and disadvantages of an Echo® MS device were explored and compared to the previously used radioenzymatic method. The emphasis was put on assay robustness and automatization of the protocol. Acoustic droplet ejection technique (ADE) and contactless dispensing of chemicals were employed, using Echo® 550 and Certus Flex® devices. These allowed to reduce reaction volume from original 20 µl to 5 µl and perform the whole reaction in a 384-well plate, decreasing the costs and increasing the throughput. Using a developed Echo® MS method, the time of analysis was shortened from 8 minutes per sample for radiometric analysis to 0,2 minute per sample. Furthermore, enzyme assay parameters, such as PNP concentration, composition of reaction mixture, incubation time and reaction termination were optimized, following the rules of HTS. The method developed in this work was employed for PNP inhibitors screening and their IC50 determination. Moreover, the HTS method enabled screening of the whole library of IOCB in-house synthesized compounds (~ 8000).... V rámci tejto diplomovej práce bola vytvorená vysoko priepustná metóda určená na testovanie potenciálnych inhibítorov enzýmu purínnukleozidfosforylázy (PNP). Použitou detekčnou metódou bola hmotnostná spektrometria, stanovované boli predovšetkým produkty reakcie katalyzovanej PNP, a to hypoxantín a ribóza-1-fosfát. Skúmané boli detekčné schopnosti a úskalia prístroja Echo® MS, ktoré boli porovnávané s predchádzajúcou rádioenzymatickou metódou. Dôraz bol kladený hlavne na robustnosť metódy a automatizáciu postupu. Boli použité techniky nanášania látok pomocou akustického dávkovania kvapiek (ADE) a bezkontaktného dávkovania roztokov s využitím prístrojov Echo® 550 a Certus Flex® . Vďaka tomu bolo možné zmenšiť enzýmovú reakciu z pôvodných 20 µl na 5 µl a realizovať ju celú v jamkách 384-jamkovej mikrotitračnej platničky, čím došlo k zníženiu nákladov a zvýšeniu priepustnosti testovaných inhibítorov. Čas analýzy jednej vzorky sa skrátil z 8 minút rádiometrickej metódy na 0,2 minúty využitím Echo® MS metódy. Ďalej boli optimalizované parametre enzýmovej reakcie ako koncentrácia PNP, zloženie reakčnej zmesi, čas reakcie a spôsob jej zastavenia, a to všetko s ohľadom na podmienky čoraz viac žiadaného testovania látok s vysokou priepustnosťou (HTS). Vytvorená metóda bola aplikovaná pre testovanie...
Keywords:
vývoj metódy; testovanie s vysokou priepustnosťou; hmotnostná spektrometria; purínnukleozidfosforyláza; inhibítory enzýmu; assay development; high throughput screening; mass spectrometry; purine nucleoside phosphorylase; enzyme inhibitors
Available in a digital repository NRGL
Adaptace enzymových metod pro testování s vysokou propustností s využitím ECHO-MS
High throughput screening for potential inhibitors of enzyme purine nucleoside phosphorylase (PNP) was developed during the work on this thesis. Products of PNP-catalysed reaction, hypoxanthine and ...
NRGL provides central access to information on grey literature produced in the Czech Republic in the fields of science, research and education. You can find more information about grey literature and NRGL at service web
Send your suggestions and comments to nusl@techlib.cz
Provider
Other bases